УВАГА! Відділення за адресою пр-т Оболонський,14 - ЗАЧИНЕНО до 30.11.2020 (в зв'язку з карантином)!Клієнти за попереднім записом обслуговуються позачергово!

Класичний бактеріологічний метод

Класичний бактеріологічний метод

Класичний бактеріологічний метод

Бактеріологічний (культуральний) метод дослідження полягає у виявленні патогенних мікроорганізмів і визначенні їх чутливості до антибіотиків. Процес виявлення мікроорганізмів складається з декількох етапів:

  1. 1. Посів матеріалу на поживні середовища.
  2. 2. Отримання чистих культур мікроорганізмів.
  3. 3. Ідентифікація мікроорганізмів.
  4. 4. Визначення чутливості до антибіотиків, антімікотіков.

Перший і другий етапи бактеріологічного дослідження однакові і для класичного, і для автоматичного бактеріологічних методів.

Перший етап

Біологічний матеріал висівають на живильні середовища. Для кожного виду біологічного матеріалу використовується певний набір. Це пов'язано з тим, що в різних видах біологічного матеріалу знаходяться різні види мікроорганізмів і необхідно, щоб виросли максимально усі. Використовуються поживні середовища загального призначення - на них зростає переважна більшість мікроорганізмів - кров'яний агар, шоколадний агар; диференціальні середовища - дозволяють відрізняти різні види мікроорганізмів - середовище Ендо для ентеробактерій, селективні середовища - ростуть тільки окремі види бактерій - ентерококагар для виявлення ентерококів, манітол-сольовий агар для виявлення стафілококів.

Посів роблять таким чином, щоб отримати окремі ізольовані колонії.

Посіви поміщають в термостат, як правило, на 24 год при 37С. Деякі посіви інкубують при 28С, а деякі протягом 48 годин. Посіви для виявлення грибів роду Candida до 5 діб, міцеліальних грибів - до 30 діб.

Другий етап.

Переглядають посіви на поживних середовищах. За зовнішнім виглядом колоній (розмір, колір, форма), певними швидкими тестами і мікроскопією визначають можливий вид мікроорганізмів і їх значення в конкретному випадку. Вибрані колонії відсівають на універсальні поживні середовища для накопичення чистої культури мікроорганізмів. У разі зростання колоній тільки одного виду можна проводити ідентифікацію і визначення чутливості без етапу накопичення чистої культури.

Третій етап.

Залежно від виду мікроорганізму проводять його ідентифікацію (визначення біохімічних і антигенних властивостей) за допомогою фіксованого набору субстратів і сироваток. Субстратами є вуглеводи, амінокислоти та інші складні сполуки. За результатами встановлюють рід і вид мікроорганізму.

Для встановлення виду деяких мікроорганізмів може знадобитися серологічна ідентифікація.

Всі середовища для ідентифікації та визначення чутливості до антибіотиків готуються і стерилізуються окремо. Така процедура дуже трудомістка, тобто вимагає багато ручної праці і часу, додаткового обладнання. Таким чином у даного методу низький рівень стандартизації.

Для ідентифікації деяких вимогливих клінічно значущих видів мікроорганізмів необхідні складні і дорогі субстрати, які в рутинній практиці важко готувати і використовувати. Через це спектр мікроорганізмів, які можна було б ідентифікувати, звужується в порівнянні з можливостями автоматичного аналізатора.

Четвертий етап.

Визначення чутливості до антибіотиків проводиться з урахуванням результатів ідентифікації та виду біологічного матеріалу.

При використанні класичного бактеріологічного методу, визначення чутливості до антибіотиків відбувається диско-дифузійним методом. Цей метод базується на вивченні зон затримки росту мікроорганізму навкруги паперового диска, який просочений антибіотиком. Залежно від зон затримки росту визначають стійкі, помірно-стійкі та чутливі штами мікроорганізмів до того чи іншого антибіотика. Даний метод є найбільш поширеним для вивчення чутливості, а також дешевим і простим у виконанні. Однак він також погано піддається стандартизації, оскільки вимагає багато ручної праці.

Крім того, відповідно до рекомендацій міжнародних організацій, які займаються вдосконаленням існуючих методик і розробкою нових (EUCAST - Європейський комітет з визначення чутливості до антибіотиків, CLSI - Інститут клінічних лабораторних стандартів), чутливість до деяких антибіотиків МОЖНА визначати диско-дифузійним методом, оскільки не визначені критерії оцінки отриманих результатів.

Це стосується:

  • 1. колістином - кишкова паличка, клебсієла і інші ентробактеріі, синьогнійна паличка, ацинетобактер,
  • 2. бета-лактами (пеніциліни, цефалоспорини, карбапенеми), глікопептиди (ванкоміцин, тейкопланін), даптоміцином, фосфоміцин - стафілококи,
  • 3. даптоміцином - стрептококи груп А, В, С і G,
  • 4. меропенем - пневмококи при менінгітах
  • 5. бета-лактами (пеніциліни, цефалоспорини, карбапенеми) - пневмококи.

Крім того існують мікроорганізми, чутливість яких до антибіотиків взагалі не можна визначати диско-дифузійним методом: Neisseria gonorrhoea, Neisseria meningitidis, все анаеробні мікроорганізми, Helicobacter pylori, Candida spp., Aspergilus spp. та інші міцеліальні гриби.

В даний час проведення мікробіологічних досліджень є важливою і актуальною діяльністю в біології та медицині, так як вони дозволяють з високим ступенем точності і достовірності підтвердити або спростувати факт присутності в організмі людини збудників інфекційних захворювань. Класичний бактеріологічний метод дослідження вирішує завдання виділення чистої культури збудника з його подальшою ідентифікацією. Завдяки мікробіологічних методів дослідження можна встановити збудників тих чи інших інфекційних захворювань і підібрати раціональне лікування цього захворювання.

Переваги автоматичного методу

- Швидкість отримання результату. Результат наших досліджень є максимально швидким. Вже на 3 добу Ви отримуєте назву мікроорганізму, який був виявлений в досліджуваному зразку, а також його чутливість до антибіотиків. (!) Термін досліджень в автоматичному методі продовжений до 5 діб за рахунок тривалого росту грибів роду Candida.

- Точність. Автоматичний аналізатор дає можливість швидко і дуже точно визначити який саме з 400 мікроорганізмів є в біоматеріалу.

- Великий спектр антибіотиків до яких визначається чутливість дозволяє лікарю призначити найбільш раціональну антибіотикотерапію з урахуванням характеру захворювання та особливостей пацієнта. До того ж визначення чутливості таким методом є максимально швидким і точним у порівнянні з класичним.

Важливо! В результаті мікробіологічного дослідження проведеного автоматичним методом антибіотикочутливість видається з показником МІК * (мінімальна інгібуюча концентрація)




Читайте також

Щитовидна залоза. Незрозумілий набір ваги
27 лютого 2020 Щитовидна залоза. Незрозумілий набір ваги

«Товстію з повітря», «пашу на тренуваннях, а стрілка вагів - на місці». Якщо ці думки вас долають, то варто звернути увагу на роботу своєї щитовидної залози, як ніяк, це її відповідальність - регулюва..

Читати далі
Чи може гель лак провокувати грибок нігтів?
24 червня 2020 Чи може гель лак провокувати грибок нігтів?

Гелеве покриття для нігтів стало справжнім проривом в мистецтві манікюру. Однак багато жінок відзначають, що після нанесення гель-лаків відбувається деформація нігтьової пластини. Природньо, виникає п..

Читати далі
Транс-жири. Прихована небезпека
23 березня 2020 Транс-жири. Прихована небезпека

Думаю, кожен з вас чув про шкоду транс-жирів, що ж, давайте розберемо, що ж з ними не так. Транс-жири (вони ж гідрогенізовані жири) - єдиний нутрієнт, які медики та науковці визнають однозначно шкі..

Читати далі
Круглий стіл "Актуальні проблеми урогенітального трихомоніазу"
11 березня 2019 Круглий стіл "Актуальні проблеми урогенітального трихомоніазу"

27 лютого 2019р. в конференц-залі «Володимирський» готеля «Хрещатик» спеціалісти нашої компанії провели круглий стіл "Мікробіологічні дослідження в гінекологічній та урологічній практиці. Актуальн..

Читати далі
Грибок нігтів: симптоми, діагностика та лікування
06 липня 2019 Грибок нігтів: симптоми, діагностика та лікування

Грибок нігтів або оніхомікоз – поширене захворювання, яке вражає людей різного віку. Грибок є не тільки косметичною проблемою, адже його розвиток небезпечний – інфекція може перейти на здорові ділянки..

Читати далі
Як знизити ризик підхопити грибкову інфекцію
12 липня 2018 Як знизити ризик підхопити грибкову інфекцію

Чи знаєте ви, що згідно світової статистики близько 20-25% населення Землі має грибкові ураження шкіри чи нігтів. Це загальносвітова проблема. Заразитися можливо при контакті з інфікованою людиною ч..

Читати далі
Грибкове ураження нігтів. Як запідозрити
15 червня 2020 Грибкове ураження нігтів. Як запідозрити

Оніхомікоз або грибкове ураження нігтів часто стає неприємним сюрпризом для пацієнта.Дуже часто люди не знають де і коли вони підхопили цей грибок. Вони можуть лише підозрювати, що зустрілися з ним в ..

Читати далі
Світлова і люмінесцентна мікроскопія
15 червня 2020 Світлова і люмінесцентна мікроскопія

Світлова і люмінесцентна мікроскопія - ефективний тандем в діагностиці мікозу.Свого часу світлова мікроскопія стала справжнім проривом в діагностиці. Однак пізніше виявилося, що не всі збудники і не в..

Читати далі
Опис методу MALDI-TOF. Трансформуюча мікробіологія
12 жовтня 2018 Опис методу MALDI-TOF. Трансформуюча мікробіологія

СУТЬ ТЕХНОЛОГІЇ MALDI-TOF(Matrix  Assisted  Laser Desorption Ionization Time Of  Flight Mass-Spectrometry)Метод матрично-активованої лазерної десорбції/іонізації:  Слайд ..

Читати далі
Системне лікування оніхомікозу. Наслідки
03 липня 2020 Системне лікування оніхомікозу. Наслідки

Системна терапія - найефективніше і надійніше лікування грибка нігтів. Що таке «системна терапія» - це прийом антибактеріальних препаратів всередину, наприклад, у вигляді таблеток або ін'єкцій. При ць..

Читати далі
Запалення складок або попрілості. Причини та лікування
06 липня 2019 Запалення складок або попрілості. Причини та лікування

Запалення складок або попрілостіЧерез мацерацію (набухання та хморщування шкіри при тривалому контакті з водою або вологою) і потовиділення складки шкіри є привілейованим вогнищем грибкових інфекцій. ..

Читати далі
Антибіотики: правила, які потрібно знати при лікуванні
04 січня 2017 Антибіотики: правила, які потрібно знати при лікуванні

Відкриття антибіотика називають найвидатнішим відкриттям цього тисячоліття. Проте вчені прогнозують, що дуже скоро настане той час, коли антибіотики не будуть ефективними, і людство знову буде охоплен..

Читати далі