Клієнти за попереднім записом обслуговуються позачергово!
8 березня - вихідний. Вітаємо зі святом!

Класичний бактеріологічний метод

Класичний бактеріологічний метод

Класичний бактеріологічний метод

Бактеріологічний (культуральний) метод дослідження полягає у виявленні патогенних мікроорганізмів і визначенні їх чутливості до антибіотиків. Процес виявлення мікроорганізмів складається з декількох етапів:

  1. 1. Посів матеріалу на поживні середовища.
  2. 2. Отримання чистих культур мікроорганізмів.
  3. 3. Ідентифікація мікроорганізмів.
  4. 4. Визначення чутливості до антибіотиків, антімікотіков.

Перший і другий етапи бактеріологічного дослідження однакові і для класичного, і для автоматичного бактеріологічних методів.

Перший етап

Біологічний матеріал висівають на живильні середовища. Для кожного виду біологічного матеріалу використовується певний набір. Це пов'язано з тим, що в різних видах біологічного матеріалу знаходяться різні види мікроорганізмів і необхідно, щоб виросли максимально усі. Використовуються поживні середовища загального призначення - на них зростає переважна більшість мікроорганізмів - кров'яний агар, шоколадний агар; диференціальні середовища - дозволяють відрізняти різні види мікроорганізмів - середовище Ендо для ентеробактерій, селективні середовища - ростуть тільки окремі види бактерій - ентерококагар для виявлення ентерококів, манітол-сольовий агар для виявлення стафілококів.

Посів роблять таким чином, щоб отримати окремі ізольовані колонії.

Посіви поміщають в термостат, як правило, на 24 год при 37С. Деякі посіви інкубують при 28С, а деякі протягом 48 годин. Посіви для виявлення грибів роду Candida до 5 діб, міцеліальних грибів - до 30 діб.

Другий етап.

Переглядають посіви на поживних середовищах. За зовнішнім виглядом колоній (розмір, колір, форма), певними швидкими тестами і мікроскопією визначають можливий вид мікроорганізмів і їх значення в конкретному випадку. Вибрані колонії відсівають на універсальні поживні середовища для накопичення чистої культури мікроорганізмів. У разі зростання колоній тільки одного виду можна проводити ідентифікацію і визначення чутливості без етапу накопичення чистої культури.

Третій етап.

Залежно від виду мікроорганізму проводять його ідентифікацію (визначення біохімічних і антигенних властивостей) за допомогою фіксованого набору субстратів і сироваток. Субстратами є вуглеводи, амінокислоти та інші складні сполуки. За результатами встановлюють рід і вид мікроорганізму.

Для встановлення виду деяких мікроорганізмів може знадобитися серологічна ідентифікація.

Всі середовища для ідентифікації та визначення чутливості до антибіотиків готуються і стерилізуються окремо. Така процедура дуже трудомістка, тобто вимагає багато ручної праці і часу, додаткового обладнання. Таким чином у даного методу низький рівень стандартизації.

Для ідентифікації деяких вимогливих клінічно значущих видів мікроорганізмів необхідні складні і дорогі субстрати, які в рутинній практиці важко готувати і використовувати. Через це спектр мікроорганізмів, які можна було б ідентифікувати, звужується в порівнянні з можливостями автоматичного аналізатора.

Четвертий етап.

Визначення чутливості до антибіотиків проводиться з урахуванням результатів ідентифікації та виду біологічного матеріалу.

При використанні класичного бактеріологічного методу, визначення чутливості до антибіотиків відбувається диско-дифузійним методом. Цей метод базується на вивченні зон затримки росту мікроорганізму навкруги паперового диска, який просочений антибіотиком. Залежно від зон затримки росту визначають стійкі, помірно-стійкі та чутливі штами мікроорганізмів до того чи іншого антибіотика. Даний метод є найбільш поширеним для вивчення чутливості, а також дешевим і простим у виконанні. Однак він також погано піддається стандартизації, оскільки вимагає багато ручної праці.

Крім того, відповідно до рекомендацій міжнародних організацій, які займаються вдосконаленням існуючих методик і розробкою нових (EUCAST - Європейський комітет з визначення чутливості до антибіотиків, CLSI - Інститут клінічних лабораторних стандартів), чутливість до деяких антибіотиків МОЖНА визначати диско-дифузійним методом, оскільки не визначені критерії оцінки отриманих результатів.

Це стосується:

  • 1. колістином - кишкова паличка, клебсієла і інші ентробактеріі, синьогнійна паличка, ацинетобактер,
  • 2. бета-лактами (пеніциліни, цефалоспорини, карбапенеми), глікопептиди (ванкоміцин, тейкопланін), даптоміцином, фосфоміцин - стафілококи,
  • 3. даптоміцином - стрептококи груп А, В, С і G,
  • 4. меропенем - пневмококи при менінгітах
  • 5. бета-лактами (пеніциліни, цефалоспорини, карбапенеми) - пневмококи.

Крім того існують мікроорганізми, чутливість яких до антибіотиків взагалі не можна визначати диско-дифузійним методом: Neisseria gonorrhoea, Neisseria meningitidis, все анаеробні мікроорганізми, Helicobacter pylori, Candida spp., Aspergilus spp. та інші міцеліальні гриби.

В даний час проведення мікробіологічних досліджень є важливою і актуальною діяльністю в біології та медицині, так як вони дозволяють з високим ступенем точності і достовірності підтвердити або спростувати факт присутності в організмі людини збудників інфекційних захворювань. Класичний бактеріологічний метод дослідження вирішує завдання виділення чистої культури збудника з його подальшою ідентифікацією. Завдяки мікробіологічних методів дослідження можна встановити збудників тих чи інших інфекційних захворювань і підібрати раціональне лікування цього захворювання.

Переваги автоматичного методу

- Швидкість отримання результату. Результат наших досліджень є максимально швидким. Вже на 3 добу Ви отримуєте назву мікроорганізму, який був виявлений в досліджуваному зразку, а також його чутливість до антибіотиків. (!) Термін досліджень в автоматичному методі продовжений до 5 діб за рахунок тривалого росту грибів роду Candida.

- Точність. Автоматичний аналізатор дає можливість швидко і дуже точно визначити який саме з 400 мікроорганізмів є в біоматеріалу.

- Великий спектр антибіотиків до яких визначається чутливість дозволяє лікарю призначити найбільш раціональну антибіотикотерапію з урахуванням характеру захворювання та особливостей пацієнта. До того ж визначення чутливості таким методом є максимально швидким і точним у порівнянні з класичним.

Важливо! В результаті мікробіологічного дослідження проведеного автоматичним методом антибіотикочутливість видається з показником МІК * (мінімальна інгібуюча концентрація)




Читайте також

Неймовірна екскурсія по світу грибів
15 січня 2021 Неймовірна екскурсія по світу грибів

В мікології відомо близько 3 мільйонів видів грибів, але багато з них ще доведеться відкрити. Гриби існують дуже давно: найстаріша скам'янілість грибів має вік близько одного мільярда років. Були вияв..

Читати далі
Моніторинг АБ-резистентності в Україні 2018-19
12 грудня 2019 Моніторинг АБ-резистентності в Україні 2018-19

28 листопада 2019 року Яновська Валентина Володимирівна, завідуюча нашої клініко-діагностичної лабораторії «IMD», к.м.н., виступила з доповіддю «Моніторинг антибіотикорезистентності в Україні 2018-201..

Читати далі
Коронавірус. Рекомендації ВООЗ для населення
16 березня 2020 Коронавірус. Рекомендації ВООЗ для населення

Весь світ зараз бореться з поширенням коронавіруса. З 12 березня в Україні був введений карантин, для стримування зростання числа хворих. На даний момент відомо, що вірус передається від людини до ..

Читати далі
Дефіцит мікроелементів або грибок нігтів?
14 серпня 2020 Дефіцит мікроелементів або грибок нігтів?

Часто дефіцитні стани йдуть рука об руку з грибком нігтів. При порушенні структури нігтя через брак тих чи інших мікроелементів, він стає більш схильний до грибкових інфекцій. До того ж, часом дуже ва..

Читати далі
Круглий стіл для пульмонологів, реаніматологів та анестезіологів
12 квітня 2019 Круглий стіл для пульмонологів, реаніматологів та анестезіологів

09 квітня 2019 р. в IMD пройшов круглий стіл для пульмонологів, реаніматологів та анестезіологів в парк- готелі «Голосієво» відбувся круглий стіл «Позагоспітальні та госпітальні пневмонії. Ді..

Читати далі
Чорна цвіль - бомба уповільненої дії
31 січня 2020 Чорна цвіль - бомба уповільненої дії

Ми всі прагнемо облаштувати наше житло якомога більше затишно, але часом не звертаємо увагу на дрібниці, які завдають величезної шкоди здоров'ю. Йдеться про чорної цвілі, - цей вид грибів зустрічаєть..

Читати далі
Як працюють антимікотики та рівень їх впливу
15 січня 2021 Як працюють антимікотики та рівень їх впливу

Три основні групи протигрибкових засобів, які використовують в клінічній практиці: азоли, поліени і алліламіни, всі зобов'язані своєю протигрибковою активністю інгибуванюю синтезу ергостеролу або безп..

Читати далі
Як стрес впливає на стан наших нігтів
15 лютого 2021 Як стрес впливає на стан наших нігтів

Сучасне життя повне стресу: емоційного, фізичного і психічного. Якщо раніше людина відчувала активний стрес - напруга, яку він міг перенаправити, то сьогодні ми частіше стикаємося з пасивним. У сучасн..

Читати далі
Насичені жири. Шкода чи користь?
23 березня 2020 Насичені жири. Шкода чи користь?

Навколо них завжди точаться запеклі суперечки. Жири поряд з білками і вуглеводами становлять незамінну частину нашого харчування. Але, не всі жири однаково корисні, а бувають і ті, які можуть виклик..

Читати далі
Складнощі лікування грибка нігтів у літніх пацієнтів
18 січня 2021 Складнощі лікування грибка нігтів у літніх пацієнтів

Лікування грибка нігтів у пацієнтів старшої вікової групи має свої особливості.Це пов'язано з тим, що з кожним роком швидкість росту нігтів природно знижується.До того ж погіршується харчування нігтьо..

Читати далі
Критерії виліковування грибка нігтів
15 червня 2020 Критерії виліковування грибка нігтів

Кожен дерматолог знає наскільки складно боротися з грибком нігтів. На відміну від мікозів інших ділянок тіла, оніхомікоз лікується досить довго. В середньому лікування займає 12-18 місяців, поки здоро..

Читати далі
Грибкові та бактеріальні шнфекції ніг
12 листопада 2019 Грибкові та бактеріальні шнфекції ніг

Грибок і бактерії є найбільш поширеними винуватцями інфікування стоп. У більшості випадків імунна система справляється з хвороботворними агентами (патогенами). Однак, бувають випадки, коли імунний зах..

Читати далі